方法名称: |
甘草浸膏--甘草酸的测定---高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定甘草浸膏中甘草酸的含量。 本方法适用于中成药甘草浸膏。 |
方法原理: |
本品经超声处理后,摇匀,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长250nm处检测甘草酸的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1.甲醇 2.0.2mol/L醋酸铵溶液 3. 冰醋酸 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按甘草酸计算应不低于2000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 0.2mol/L醋酸铵溶液 冰醋酸=67 33 1 2.2检测波长:250nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1.称取供试品 精密量取本品细粉约0.25g,为供试品。 2.对照品溶液的制备 精密称取甘草酸单铵盐对照品10mg,置50mL量瓶中,加流动相45mL,超声处理使溶解,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成每1mL含甘草酸单铵盐对照品0.2mg,折合甘草酸为0.1959mg的溶液。 3.供试品溶液的制备 供试品,置50mL量瓶中,加流动相45mL,超声处理(功率200W,频率50kHz)30分钟,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过。精密量取续滤液10mL,置25mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长250nm处测定甘草酸(C42H62O16)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p274。 |