甘草流浸膏--甘草酸的测定---高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定甘草流浸膏中甘草酸的含量。

本方法适用于中成药甘草流浸膏。

本品经超声处理后，摇匀，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测甘草酸的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇

2.0.2mol/L醋酸铵溶液

3.冰醋酸

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按甘草酸计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.2mol/L醋酸铵溶液 冰醋酸=67 33 1

2.2检测波长：250nm

2.3柱温：室温

1.称取供试品

精密量取本品1mL，为供试品。

2.对照品溶液的制备

精密称取甘草酸单铵盐对照品10mg，置50mL量瓶中，加流动相45mL，超声处理使溶解，取出，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含甘草酸单铵盐0.2mg，折合甘草酸为0.1959mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品，置50mL量瓶中，加流动相约20mL，超声处理（功率200W，频率50kHz)30分钟，取出，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液10mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长250nm处测定甘草酸（C₄₂H₆₂O₁₆)的峰面积，计算出其含量。