方法名称： |
决明子—五种蒽醌类化合物的测定— HPLC |
应用范围： |
本方法适用于决明子中五种蒽醌类化合物（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)含量的测定 |
方法原理： |
本品粉碎后加95 %乙醇回流提取，经液相色谱分离，在440 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Waters 600型HPLC仪（美国Waters 公司)，包括：Waters 600E 泵，996 PDA二极管阵列检测器，Millennium32色谱工作站，7725i手动进样器，柱温箱，在线氦气脱气 色谱条件 色谱柱：Symmetry C18 色谱柱（5 μm，3. 9 mm× 250 mm)，Symmetry C18保护柱（5 μm，3. 9 mm×20 mm) 流动相：甲醇—0. 1 %磷酸水溶液（90∶10) 流速：0. 8 mL/min 柱温：25 ℃ |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取干燥至恒重的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚适量，分别用甲醇溶解于10 mL量瓶中，使每1mL溶液含大黄素104 μg、大黄酚116 μg、大黄素甲醚113 μg、大黄酸106 μg、芦荟大黄素170 μg。分别吸取上述溶液2 mL、2 mL、2 mL、2 mL、1 mL于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得混合对照品溶液。 |
操作步骤： |
分别精密吸取混合对照液以及游离、总蒽醌类供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
于超等. HPLC 法测定不同产地决明子中五种蒽醌类化合物. 基层中药杂志.2002，16（2)：8～10 |
