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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:不同产地苦参—生物碱—HPLC中药质量控制方法/操作步骤
    

不同产地苦参—生物碱—HPLC

  
方法名称:
  不同产地苦参—生物碱—HPLC
应用范围:
  本方法适用于不同产地苦参中生物碱含量的测定
方法原理:
 本品加氯仿、水超声提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Agilent 1100高效液相色谱仪(四元泵),Agilent工作站

色谱条件    色谱柱:linerilNH2色谱柱(250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-磷酸水溶液(pH2)-无水乙醇(8∶1∶1);流速:0.8 mL/min;柱温:25 ℃;检测波长:220 nm
试样制备:
 

对照品溶液的制备    准确称取苦参碱化苦参碱、槐定碱对照品约1 mg,分别置于25 mL容量瓶中,加乙睛-磷酸水溶液(8∶1∶1)溶解定容,制成苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱对照品溶液。

供试品溶液的制备    取苦参中药材60 ℃干燥后粉碎过60目筛,称取苦参干燥粉末0.4 g,加氯仿20 mL,氨水0.2 mL,超声提取0.5小时,过滤,精密量取滤液8 mL,用氧化铝柱(中性200目)进行柱层析,用氯仿-甲醇(7∶3)10 mL先后洗脱,合并洗脱液,挥去溶剂,残渣置于10 mL容量瓶中,用无水乙醇溶解定容做为供试品溶液。
操作步骤:
  分别精密吸取对照液以及供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  韩刚,翟丽,王炳强.高效液相色谱法测定不同产地苦参中生物碱的含量.华北煤炭医学院学报. 2005.7(2):140~141
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