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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:苦参—苦参碱—HPLC中药质量控制方法/操作步骤
    

苦参—苦参碱—HPLC

  
方法名称:
  苦参苦参碱—HPLC
应用范围:
  本方法适用于苦参中苦参碱含量的测定
方法原理:
 本品加氯仿、浓试液超声提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    LC-10Avp高效液相色谱仪,SPD-10Avp紫外-可见波长

检测器,日本岛津公司。JS-3030色谱工作站,(大连江申公司),Rheodyne7725进样阀(美国Rheodyne公司)

色谱条件    色谱柱:Kromasil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)(大连江申公司);流动相:甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液pH7.6-三乙胺(15∶25∶65∶0.1用磷酸调至pH7.8);流速:0.8 mL/min;检测波长:220 nm;进样量:20 μL
试样制备:
 

对照品溶液的制备    精密称取苦参碱对照品10.87 mg,置25 mL量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液(0.4348 g·/L)。

供试品溶液的制备    取苦参粉末1.0 g,精密称定,置100 mL量瓶中,精密加氯仿50 mL、浓氨试液1 mL,密塞,称定重量,时时振摇,放置24 h后,超声30 min,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10 mL,加在中性化铝柱(1 cm×9 cm,内装2 cm中性氧化铝)上,收集过柱氯仿液(流速1.0 mL/min,再用20 mL氯仿-甲醇(7∶3)洗脱(流速1.0 mL/min),合并洗脱液与过柱氯仿液,置60 ℃水浴蒸干。残渣用甲醇溶解并定容至5 mL,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取苦参碱对照液以及苦参供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苦参碱含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  张毅.HPLC法测定苦参中苦参碱的含量.安徽医药. 2004.8(2):123~124
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