方法名称： |
含苦参制剂—苦参汤有效部位—黄岑苷、汉黄岑苷、黄岑素、汉黄岑素—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于苦参汤有效部位中黄岑苷、汉黄岑苷、黄岑素、汉黄岑素含量的测定 |
方法原理： |
本品加稀乙醇回流提取，经液相色谱分离，在280 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Waters 515高效液相色谱仪；2487紫外检测器，Millennium32软件系统；25 μL可调进样器 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄 芩素对照品4.30、3.70、3.26、3.40 mg，分别置50 mL量瓶中，加甲醇超声溶解，并稀释至刻度摇匀，备用。 供试品溶液的制备 按苦参汤处方单味药比例，称取苦参、黄芩、生地黄一定量，混匀，用稀乙醇回流提取。乙醇提取液减压回收溶剂，残留物加水分散，通过大孔吸附树脂柱，树脂柱水洗去杂后，用稀乙醇洗脱。乙醇洗脱液回收溶剂，残留物减压干燥，得苦参汤有效部位。精 密称取苦参汤有效部位约5 mg置10 mL量瓶中，加50 %甲醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，备用。 |
操作步骤： |
分别精密吸取黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素对照液以及苦参汤有效部位供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
刘斌，石任兵，姜艳艳.HPLC法测定苦参汤有效部位中4种黄酮类成分含量.北京中医药大学学报. 2005.28（6)：59~62 |
