含苦参制剂—苦参及苦参汤—黄腐醇、苦参啶—HPLC

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方法名称：	含苦参制剂—苦参及苦参汤—黄腐醇、苦参啶—HPLC
应用范围：	本方法适用于苦参及苦参汤中黄腐醇、苦参啶含量的测定
方法原理：	本品药材加甲醇超声提取、处方加稀乙醇回流提取，经液相色谱分离，在365 nm处测定峰面积，外标法计算含量
仪器设备及实验条件：	仪器 Waters 515高效液相色谱仪，2487紫外检测器，Millennium³²软件系统，25 μL可调进样器色谱条件色谱柱：Phenomenex LunaC₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0.38 %磷酸水溶液（75∶25)；流速：1.0 mL/min；检测波长：365 nm；柱温：室温；进样量：20 μL
试样制备：	对照品溶液的制备精密称取黄腐醇和苦参啶对照品3.16 mg和5.10 mg，分别置100 mL量瓶中，加甲醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述黄腐醇对照品溶液1 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备 1)按苦参汤处方单味药比例，称取苦参、黄芩、生地黄一定量，混匀，用稀乙醇回流提取。乙醇提取液减压回收溶剂，残留物加水分散，通过大孔吸附树脂柱，树脂柱水洗去杂后，用稀乙醇洗脱。乙醇洗脱液回收溶剂，残留物减压干燥，得苦参汤有效部位。精密称取苦参汤有效部位约30 mg，置10 mL锥形瓶中，精密加甲醇2 mL，超声溶解，用0.45 μm微孔滤膜滤过后备用。2)苦参药材溶液取苦参药材1 g，粉碎（40目)，混匀。精密称取约0.2 g，置25 mL锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，称重。超声提取40 min，再称重，以甲醇补至原重。滤过，弃去初滤液，精密移取续滤液5 mL，回收溶剂至干，残留物用甲醇溶解转至2 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，备用。
操作步骤：	分别精密吸取黄腐醇和苦参啶对照液以及苦参及苦参汤供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算黄腐醇和苦参啶含量。
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备注：
参考文献：	刘斌，石任兵，陈硕等.HPLC法测定苦参及苦参汤中黄腐醇和苦参啶的含量.药物分析杂志. 2006.26（5)：564~567