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木瓜-咖啡酸、绿原酸的含量测定方法-HPLC

医药数据库中心 药学论坛
　　
方法名称：
   木瓜-咖啡酸、绿原酸的含量测定-HPLC
应用范围：
   用于木瓜中咖啡酸、绿原酸的含量测定
方法原理：
  本品细粉加甲醇超声提取，经液相色谱分离，在283 nm处测定峰面积，外标法计算含量
仪器设备及实验条件：
  

仪器    DIONEX（P680HPLC PUMP，SOLVENTRACK SOR-100)

    色谱条件    色谱柱：Kromasil  C18（10 nm～5 μm，4.6 mm×250 mm)；流动相： （A)乙腈-甲醇（6∶4) （B)0. 05 %磷酸梯度洗脱，0～12 min（10 %～30 %A，90 % ～70 %B)，12～30 min（30 %～50 %A，70 %～50 %B)，30～35 min （50 %～70 %A，50 %～30 %B)，35～45 min （70 %～90 %A，30 %B～10 %B)，45～50 min （90 %～60 %A，10 %～40 %B)，50～60 min（60 %～10 %A，40 %～90 %B)，60～70 min （10 %A，90 %B)；流速：0. 8 mL/min；检测波长：283 nm
试样制备：
  

对照品溶液制备    分别精密称取咖啡酸、绿原酸对照品适量，分别加甲醇制成每毫升含0. 106 mg咖啡酸、0. 492 mg绿原酸对照品溶液；然后分别精密吸取咖啡酸对照品溶液5 mL、绿原酸对照品溶液1 mL，加甲醇定容至25 mL，制成两种对照品的混合溶液。

供试品溶液制备    精密取药材粉末0. 25 g于100 mL具塞锥形瓶中，精密吸取50 mL甲醇，称重，盖好瓶塞后超声提取45 min，称量，并用甲醇补足重量，放冷至室温，滤过，取续滤液，然后用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。
操作步骤：
   分别精密吸取咖啡酸、绿原酸对照液以及木瓜供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算咖啡酸、绿原酸含量。
附件：
   点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注：
  
参考文献：
   黄志军，陶君彦，熊富良等. 木瓜水溶性部位高效液相色谱法指纹图谱研究. 时珍国医国药. 2006，17（10)：1869～1871
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