含黄芩制剂—小柴胡汤—黄芩苷的含量测定方法—HPLC-DAD-TOF/MS

医药数据库中心药学论坛

方法名称：	含黄芩制剂—小柴胡汤—黄芩苷的含量测定—HPLC-DAD-TOF/MS
应用范围：	用于小柴胡汤中黄芩苷的含量测定。
方法原理：	本品用70%乙醇回流提取，经液相色谱仪分离，按外标法计算含量
仪器设备及实验条件：	仪器设备 Agilent1100高效液相色谱仪；二极管阵列检测器。色谱条件色谱柱：Agilent Zorbax XDB-C18，(2.1mm×50mm，1.8μm)；流动相：水(0.025%，A液)-甲醇（0.025%甲酸，B液)，梯度洗脱程序如下：0～1min：70%A～30%B;1～45min：25%A～75%B;45～55min：20%A～80%B;55～65min：100%B.流速：0.15ml/min；柱温：25℃；进样量0.25μl，运行时间：75min，离子源：APCIESI源，正离子方式监测，用于定量分析的离子m/z803.4200～803.4900，干燥气温度：350℃，雾化气压力：275792Pa，雾化气流速：10L/min，碰撞碎片电压:200V。
试样制备：	对照品溶液的配制分别精密称取黄芩苷对照品13.65mg，置于10ml量瓶中用甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准储备液。取储备液各5.0ml于25ml量瓶中，经稀释，配成标准溶液，黄芩苷浓度为455.0，303.3，151.6，75.80，37.90，7.58，0.758μg/ml. 供试品溶液的制备分别取自制的小柴胡汤0.5g，精密称定，置100ml平底烧瓶中，加70%乙醇，回流40min，放冷至室温，过滤，收集滤液，重复提取3次，合并滤液，挥干，甲醇定容至10ml，进样前用0.22um滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液进样测定。
操作步骤：	精密吸取对照品及供试品溶10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以外标法含量。
附件：	点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注：
参考文献：	赵白云，朱臻宇。王彬等. HPLC-DAD-TOF/MS法测定小柴胡汤中柴胡皂苷a黄芩苷和甘草酸的含量.第二军医大学学报.2007.28（5)：527～530