方法名称： |
金银花提取物-绿原酸类成分-HPLC |
应用范围： |
本方法适用于金银花提取物中绿原酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定 |
方法原理： |
本品加水煎煮提取，经液相色谱分离，在327 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
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仪器 Agilent-1100高效液相色谱仪，四元泵，自动进样器，柱温箱，DAD二极管阵列检测器，AgilentAl0. 02工作站 | 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18（4. 6 mm ×250 mm，5 μm)；流动相：A为乙腈，B 为0. 3 磷酸溶液，A：0→20 min 5 →10，20→45 min 10 →26；流速：1 mL/min；检测波长：327 nm；柱温：30 ℃ |
试样制备： |
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对照品溶液制备 分别精密称取绿原酸和3，5-二咖啡酰基奎宁酸适量，加50 甲醇制成每1 mL含绿原酸0. 408 mg、3，5-二咖啡酰奎宁酸0. 278 mg的混合溶液。精密吸取6 mL置10 mL量瓶中，加50 甲醇至刻度，摇匀，即得。 | 供试品溶液制备 取金银花药材200 g，3份，分别照文献所收载的石-硫法和改良石-硫法进行提取（两次煎煮用水量均分别为20倍和12倍) 、处理，得浓缩液，继续减压浓缩得稠膏，真空干燥，粉碎成细粉，分别得3种金银花提取物A、B、C。取提取物A、B细粉各75 mg、提取物C细粉25 mg，精密称定，分别置10 mL量瓶中，加50 甲醇至刻度，振摇使完全溶解（B有少量不溶物)，0. 45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取绿原酸和3，5-二咖啡酰基奎宁酸混合对照液以及金银花供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算绿原酸和3，5-二咖啡酰基奎宁酸含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
陈有根等. 3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较. 中成药.2007，29（3)：362～364 |
