方法名称： |
复方板蓝根颗粒--氨基酸含量测定-- HPLC法 |
应用范围： |
测定复方板蓝根颗粒中氨基酸含量 |
方法原理： |
样品加40%乙醇超声提取，衍生化后经液相色谱仪分离，在360 nm 处测定峰面积，标准曲线法计算氨基酸含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 大连依利特公司P200Ⅱ泵， UV200型紫外检测器，Echrom 98色谱数据处理工作站； |
试样制备： |
标准曲线的制备 分别精密称取精氨酸（Arg)和脯氨酸（Pro)对照品约10mg，置10mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即分别得Arg和Pro 对照品溶液。另精密称取Arg和Pro对照品31.35mg和33.02mg，置25mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品混合溶液。精密吸取对照品混合溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mL，置10 mL量瓶中，加衍生缓冲液1.0mL，摇匀，加衍生溶液1.0mL，摇匀，避光，于 衍生缓冲溶液的制备 0.5 mol/L NaHCO3 (pH9)(即称取NaHCO3 4.2g，加水溶解并定容至100mL)。 衍生溶液的制备 精密量取2,4-二硝基氟苯1mL至100mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度。 |
操作步骤： |
按上述方法，制备供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，代入标准曲线计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
万绍晖,徐玫,王荔等.反相高效液相色谱柱前衍生化法测定复方板蓝根颗粒中氨基酸的含量.中药材.2005,28(7):594-595 |
