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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:赤芍--赤芍总苷含量测定方法--HPLC法3中药质量控制方法/操作步骤
    

赤芍--赤芍总苷含量测定方法--HPLC法3

  
方法名称:
  赤芍--赤芍总苷含量测定--HPLC法3
应用范围:
  测定赤芍总苷中芍药苷含量
方法原理:
 赤芍经水提取得赤芍总苷,赤芍总苷以甲醇稀释,经液相色谱仪分离,在230nm处测定峰面积,外标法计算芍药苷含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  高效液相色谱仪:岛津LC-10ATVP泵,SPD-10AVP 可见-紫外检测器; 

  色谱条件  色谱柱:Shim-pack CLC-ODS (岛津);流动相:乙腈-水-磷酸(40:60:0.1),流速:1mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:230 nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备   精密称取芍药苷对照品,置于10 mL 容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,即为对照品储备液(2.2mg/mL)。精密吸取此储备液5mL,置25 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得。

供试品溶液的制备   

赤芍总苷的制备  称取赤芍1kg,每次以10倍水提取,共3次,合并水提液,加入一定量的明胶溶液,沉淀,过滤,滤液加至大孔树脂柱,先以水洗,至洗出液无色,再以一定浓度的乙醇洗脱,并以HPLC方法测定洗脱液,至芍药苷基本洗脱完全。将洗脱液均分成甲、乙2份:甲份,减压薄膜浓缩至浓溶液,并冷冻干燥 ,,得赤芍总苷甲;乙份,过超滤器超滤,得超滤液,将超滤液减压薄膜浓缩成浓溶液,并冷冻干燥,得赤芍总苷乙。

样品溶液的制备  分别称取赤芍总苷甲、乙各0.1g,精密称定,分别加入甲醇溶解并定容至25 mL,各精密吸取1mL,加甲醇,定容至10 mL,滤过,即得。
操作步骤:
  精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5~10μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图和峰面积。按外标法以峰面积计算供试品中芍药苷的含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  陈寅生,姚仲青.膜分离与大孔树脂吸附技术在赤芍总苷提取与分离中的应用.南京中医药大学学报. 2006,22(6):406, 408
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