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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:罗汉果—罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的测定方法—HPLC中药质量控制方法/操作步骤
    

罗汉果—罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的测定方法—HPLC

  
方法名称:
  罗汉果 —罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的测定 — HPLC
应用范围:
  本方法适用于罗汉果中罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ含量的测定
方法原理:
 本品加甲醇回流提取,经液相色谱分离,在203 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Agilent-1100分析型高效液相色谱仪,包括二极管阵列多波长检测器DAD、四元梯度泵、在线真空脱气机、7725i动进样器、HP化学工作站(美国Agilent公司)

试剂    罗汉果甙ⅡE、Ⅲ对照品(本实验室自制,TLCRf值、IRNMR值均与文献报道一致,液相色谱峰为单峰,纯度分别达到98.1 %98.5 %)

    色谱条件    色谱柱:ZORBAX SB-C18柱(4. 6 mm ×150 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(体积比25:75);流速:1 mL/min;检测波长:203 nm;柱温:25 ℃;进样量:10 μL
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取罗汉果苷ⅡE对照品9. 67 mg10. 35 mg,置于10 mL容量瓶中,用流动相乙腈-水(体积比2575)溶液,超声溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液备用。

    供试品溶液制备    精密称取样品1. 0000 g于100 mL锥形瓶,加入甲醇20 mL回流提取3次(2 h ×1 h ×1 h),过滤,滤液减压回收甲醇至干,干状物加入蒸馏水适量,超声溶解,上HPD-200大孔树脂柱,先水洗80 mL,再用85 ℃乙醇100 mL洗脱,乙醇洗脱液直接通过330、732阴阳离子交换柱,收集流出液,柱再用约100 mL 85 ℃乙醇洗脱,合并洗脱液减压回收至干,用乙腈-水(体积比25:75)溶液定容至5 mL容量瓶,用微孔滤膜(0. 45 μm)过滤,滤液作为供试品溶液备用。
操作步骤:
  分别精密吸取罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ对照液以及罗汉果供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  李典鹏等. HPLC 法测定罗汉果中罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的含量. 天然产物研究与开发 .2006,18:850~853
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