方法名称: |
儿茶—儿茶素和表儿茶素—HPLC-UV |
应用范围: |
用于儿茶中主要成分儿茶素及表儿茶素含量的测定 |
方法原理: |
本品用甲醇-水(1:1)超声提取,经液相色谱仪分离,在280nm测定,按外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 PE LC-200 高效液相色谱仪 LC295紫外可见检测器;HP3295 积分仪。 色谱条件 色谱柱:Phenomenex OD(2) 柱(5μm,4.6 mm×150 mm) ;流动相:0.04mol·L -1柠檬酸-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃( 45∶8∶2 );流速:0.8 mL·min-1 。柱温:35 ℃。检测波长:280 nm。进样量:5~10μL。 |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取儿茶素对照品16.07mg及表儿茶素对照品13.21mg,置25mL容量瓶中, 以甲醇-水(1∶1) 超声溶解并稀释至刻度, 摇匀,即得对照品溶液。 供试品溶液的制备 取儿茶样品2份,每份0.02 g,分别精密称定,置50mL容量瓶中,加甲醇-水(1∶1) 40mL超声20min溶解,并以甲醇-水(1∶1) 稀释至刻度,溶液过0.45μm 滤膜,即得供试品溶液。 |
操作步骤: |
精密吸取对照液以及供试品溶液5~10μL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。按外标计算儿茶素和表儿茶素含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
王钢力,于建东,田金改等. 儿茶药材化学成分分析—反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量. 药物分析杂志.1999,19(2):88~90 |