方法名称： |
曼地亚红豆杉枝叶—紫杉醇的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于地亚红豆杉枝叶紫杉醇含量的测定 |
方法原理： |
本品细粉用无水乙醇超声提取，经液相色谱仪分离，在227nm测定，外标法计算紫杉醇含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 BT8100型高效液相色谱仪；K-2501 型紫外检测器；N 2000双通道色谱工作站 色谱条件 色谱柱： phenomenex C18 ( 250mm×4.60mm，5μm)，流动相：甲醇-水(65∶35) ；流速：0. 7mL /min；检测波长：227 nm；柱温：25℃。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取紫杉醇对照品5.1 mg，以甲醇溶解并定溶于10mL容量瓶中，制成5.0g/mL的紫杉醇对照品储备液 供试品溶液的制备 精密称取5. 0000g曼地亚红豆杉干枝叶粉末，加入100mL无水乙醇，冷浸过夜，超声处理40min，静置过滤，滤渣再以滤膜滤过，合并滤液，于45℃真空浓缩至18mL左右，加入2mL蒸馏水，以50mL正己烷萃取，再以25mL正己烷萃取2次。乙醇相于45℃真空浓缩至无醇，浓缩物以50mL氯仿充分溶解，加入50mL 1mol/L碳酸钾溶液(含5%氯化钠) 搅拌20min，静置分层，氯仿相再以25mL该碳酸钾溶液洗涤2次。氯仿相转移至50mL容量瓶，并以氯仿定容，作供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液6μl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
王志刚，周春山，颜家良等. 高效液相色谱法测定曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的含量. 应用化工.2007，36（1)：84～86 |
