方法名称： |
西藏红豆杉—紫杉醇的测定—HPLC-DAD |
应用范围： |
用于西藏红豆杉中紫杉醇含量的测定 |
方法原理： |
本品细粉用甲醇超声提取，经液相色谱仪分离，在230nm测定，外标法计算紫杉醇的含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Agilentl100高效液相色谱仪；DAD 检测器。 色谱条件 色谱柱：phenomenexluna C18 柱( 250×4.60mm，5um) ;柱温：30℃；流动相：甲醇-水( 60 ：40)；流速：1ml/ min；检测波长：230nm；进样量：10µl。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取紫杉醇标准品1.00mg，定容于1ml 甲醇中，稀释得0. 100mg·ml-1浓度的甲醇溶液，作为对照品贮备液。 供试品溶液的制备 取红豆杉各部位(大树皮、枝树皮、果、叶)，真空干燥后粉碎，过100目筛，置于密封容器中保存精密称取样品2.0g，置于圆底烧瓶中，加入甲醇20ml，置于超声清洗器中于50℃超声振荡提取60分钟，甲醇液过滤，滤渣和滤纸复加20ml 甲醇，在相同条件下超声提取40分钟，再次过滤后，滤渣和滤纸再加20ml甲醇，在相同条件下超声提取20分钟. 合并滤液，减压蒸干后，残渣加30ml氯仿，超声振荡30分钟，过滤，取氯仿层，回收氯仿，于残渣中加少许甲醇，超声萃取，甲醇液离心，上层清液以甲醇定容至1ml.叶提取物经自制氧化铝柱，用氯仿洗脱非极性成分后，甲醇洗脱，浓缩，以甲醇定容至1ml.定容后的甲醇液经0.45μl滤膜过滤，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液1Oμl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
林鹏程，高东红，马孝贤等. 西藏红豆杉不同部位紫杉醇含量的分布研究. 青海师专学报(教育科学).2003，（6)：87～88 |
