方法名称: |
人工栽培南方红豆杉—紫杉醇的测定—HPLC-UV |
应用范围: |
用于对人工栽培南方红豆杉枝、叶、皮、种子中紫杉醇含量的测定 |
方法原理: |
本品细粉用甲醇-二氯甲烷(1∶1)超声提取,经液相色谱仪分离,在227nm测定,外标法计算紫杉醇的含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 A lltech 426 型高效液相色谱仪;200型紫外检测器;Alltech 外置工作站。 色谱条件 色谱柱:A lltima C18柱(5mm×250mm,5 µm);柱温: 室温;流动相: 甲醇-水(65∶35);流速: 1mL/min;检测波长: 227nm; 每次进样量: 20µL |
试样制备: |
对照品溶液制备 供试品溶液的制备 将人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶子和皮于40℃干燥后碾成粉末(过孔径为0.32 mm的筛),分别精确称取2.5g于200mL三角瓶中,用100mL混合溶剂浸泡24 h,次日超声震荡提取30min,过滤,残渣用甲醇冲洗3次,合并滤液,30℃下减压浓缩,提取物用水(50mL×3) 和正己烷(50mL×3) 萃取,水层用二氯甲烷萃取3次,合并二氯甲烷萃取液,然后用活性炭(5g)脱色,过滤,滤液于25℃下减压干燥,用甲醇1mL溶解,0.45µm微孔滤膜过滤,分别配制好种子、枝条、叶和皮的样品制备液, |
操作步骤: |
精密吸取对照液以及供试品溶液2Oμl,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,计算含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
李俊,牙启康,苏小建等.人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析. 广西师范大学学报(自然科学版).2005,23(2):68~70 |