方法名称： |
红豆杉组织培养物—紫杉醇的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于红豆杉组织培养物中紫杉醇含量的测定 |
方法原理： |
本品细粉用三氯甲烷-甲醇（6∶4)回流提取提取，经液相色谱仪分离，在227nm测定，外标法计算紫杉醇的含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 LC-9A 型高效液相色谱仪(日本岛津公司)；CR-9A记录仪。 色谱条件 色谱柱：Sh im Pack CLC-ODS；流动相：甲醇-乙腈-水(25∶24∶41)；流速：1mL/m in；检测波长：227 nm。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精确称取紫杉醇标准品，配成1mg/mL 的甲醇溶液，作为对照品贮备液。 供试品溶液的制备 取红豆杉组织培养物3～ 5 g，60℃烘干至恒重，粉碎，过60 目筛。用三氯甲烷-甲醇（6∶4)回流提取数次，提取液减压浓缩，石油醚脱脂后，经减压真空低温干燥至恒重。准确称取样品适量，加流动相溶解，配制成浓度为0. 3mg/mL的待测溶液，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液1Oμl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
孙 ，胡正海，成小飞等. 利用高压液相色谱法测定红豆杉组织培养物中紫杉醇的含量. 西北大学学报(自然科学版).1999，29（2)：159～161 |
