方法名称: |
陆英-乌索酸和齐墩果酸含量-HPLC-UV |
应用范围: |
用于陆英中乌索酸和齐墩果酸含量测定 |
方法原理: |
本品加5 %乙醇回流提取,经液相色谱分离,在210 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 高效液相色谱仪Waters(515泵,2996光电二极管矩阵检测器,7725I进样阀,20 μL定量环,Empower中文色谱工作站) 色谱条件 色谱柱:SymmetryShield RP18 色谱柱(3.9×150 mm,美国Waters公司);流动相:乙腈:水:磷酸(体比65:35:0.1);流速:1.0 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:25 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取乌索酸对照品4.8 mg,齐墩果酸对照品4.9 mg,分别置于5 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成含乌索酸0.96 mg/mL和齐墩果酸0.98 mg/mL的对照品混合溶液。 供试品溶液制备 精密称取过20目筛的陆英药材2.0 g置于圆底烧瓶中,加入75 mL浓度95 %乙醇,水浴加热回流提取2 h,提取液过滤,定量转移至100 mL容量瓶中,乙醇定容。摇匀后取滤液2 mL于离心机(3000 r/min)中离心5 min,取上清液用0.45 μm微孔滤膜过滤,得样品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取乌索酸和齐墩果酸对照液以及陆英供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算乌索酸和齐墩果酸含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
邹盛勤,陈武. 陆英中乌索酸和齐墩果酸动态含量的研究. 安徽农业科学. 2005,33(4):642~643,666 |