方法名称: |
绿豆-齐墩果酸的含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于绿豆中齐墩果酸的含量测定 |
方法原理: |
本品粉碎后加无水乙醇回流提取,经液相色谱分离,在210 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters590 泵;U6K 进样器;Millennium32R色谱工作站;Waters 柱温控制器;Hitachi 635M双波长紫外检测器 色谱条件 色谱柱:Nucleodur C18柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相:乙醇/水(体积比为80∶20);流速:1.0 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:40 ℃
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试样制备: |
对照品溶液的制备 精确称取齐墩果酸对照品10.0 mg,用体积比为80 %乙醇溶解并定容在10 mL容量瓶中,得1.0 g/L齐墩果酸对照品储备液。 供试品溶液的制备 精确称取粉碎的植物样品5.00 g,置于250 mL蒸馏烧瓶中,加50 mL无水乙醇,在水浴上回流提取3次( 每次1 h),冷却,过滤,收集滤液,将滤液在旋转浓缩器上真空浓缩至干(70 ℃水浴),残渣加20 mL 4mol/L HCl加热回流30 min(100 ℃水浴),冷却溶液,直接加10 mL氯仿;萃取3次(每次15 min)。取10 mL萃取液于50 ℃水浴挥去氯仿,残渣用80 %乙醇溶解并定容为10 mL,离心,待测。 |
操作步骤: |
分别精密吸取齐墩果酸对照液以及绿豆供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算齐墩果酸含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
吴 波,张寒俊. 高效液相色谱法测定食品中齐墩果酸的含量. 食品科学. 2005,26(12):176~178 |