方法名称: |
陆英-乌索酸和齐墩果酸含量-RP-HPLC-UV |
应用范围: |
用于陆英中乌索酸和齐墩果酸含量测定 |
方法原理: |
本品加95 %乙醇回流提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters高效液相色谱仪: 600泵,2478紫外可见光检测器,7725I进样阀,柱温箱,Millennium32 色谱管理系统 色谱条件 色谱柱:Symmetry C18柱(3. 9 mm ×150 mm,5 μm,美国Waters公司);流动相:甲醇-水(88∶12);流速:0. 6 mL/min;检测波长:220 nm;柱温:25 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液的制备 精确称取乌索酸对照品19. 6 mg,齐墩果酸对照品19. 8 mg,分别置于10 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成含乌索酸1. 96 mg/mL和齐墩果酸1. 98 mg/mL的对照品溶液,备用 供试品溶液的制备 采用酸解乙醇回流法提取。分别称取干燥至恒重的陆英药材2. 0 g,置于圆底烧瓶中,加入体积分数为95 %乙醇60 mL及体积分数为20 %盐酸2 mL,水浴加热回流提取2 h。过滤,滤液用饱和氢氧化钠溶液调pH值为5,定量转移至100 mL量瓶中,乙醇定容,摇匀。取2 mL于离心机(3000 r/min)中离心5 min,上清液用0. 45 μm微孔滤膜过滤,得样品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取乌索酸和齐墩果酸对照液以及陆英供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算乌索酸和齐墩果酸含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
邹盛勤,刘传安. 反相高效液相色谱法测定陆英中乌索酸和齐墩果酸含量. 中国现代应用药学杂志200. 2005,22(4):330~333 |