陆英-乌索酸和齐墩果酸的含量测定方法-HPLC-UV

仪器    Waters 高效液相色谱仪：600泵，2478紫外可见光检测器，7725I进样阀，Millennium32色谱管理系统

色谱条件    色谱柱：Symmetry C18 柱（3. 9 mm ×150 mm，美国Waters公司)；流动相：甲醇-水（88∶12)；流速：0.6 mL/min；检测波长：220 nm；柱温：25 ℃

对照品溶液的制备    精确称取乌索酸对照品19. 6 mg，齐墩果酸对照品19. 8 mg，分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含乌索酸1. 96 mg/mL和齐墩果酸1. 98 mg/mL的对照品混合溶液，备用。

供试品溶液的制备    分别称取干燥至恒重的陆英药材2. 0 g，置于圆底烧瓶中，加入60 mL 95 %乙醇及2 mL 20 %盐酸，水浴加热回流提取2 h。过滤，滤液用饱和氢氧化钠溶液调pH值为5，定量转移至100 mL容量瓶中，乙醇定容。摇匀后取滤液1 mL于离心机（3000 r/min)中离心5 min，取上清液（用0. 45 μm微孔滤膜过滤)测定。

分别精密吸取乌索酸和齐墩果酸对照液以及陆英供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算乌索酸和齐墩果酸含量。