龙葵药材-甾体类生物总碱含量测定方法-HPLC-UV

 仪器    液相- 质谱联用仪（SHIMADZU 2010A LC-MS)，SPD-PDA检测器（日本岛津有限公司)，澳洲茄胺标准品（北京丰斯特公司)

色谱条件    色谱柱：汉邦C18柱；流动相：乙腈/水（55：45，水相pH值用磷酸调节至2.7)；流速：1.2ml/min；检测波长：210 nm

对照品溶液制备    无。

 供试品溶液制备    1)龙葵甾体类生物总碱的提取：分离称取龙葵样品，采用V[c（HCl)=2 mol/L]：V（乙醇)=1：4溶液润湿24 h后，料液比按1 g：10 mL加入乙醇，在65 ℃的温度下醇提两次，每次4 h。过滤后合并滤液，滤液经减压蒸馏后得到黄绿色固体。用0.5 mol/L的HCl溶解后，用氯仿萃取三次，去氯仿层。水相用NaOH溶液调节至pH为10.5，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干后用甲醇溶解并定容至50 mL，得到龙葵甾体类生物总碱的甲醇溶液。2)苷元澳洲茄胺的提取：将含甾体类生物总碱的甲醇溶液定量取出并减压蒸干后，残留物用40 mL V[c（HCl)=2 mol/L]：V（乙醇)=1：1溶液溶解，在100 ℃的温度下水解，水解后将溶液中乙醇蒸馏去除，余液用氯仿萃取三次，取酸水层。经NaOH溶液调节至pH为10.5后，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干并用甲醇溶解，定容至50 mL，得到澳洲茄胺的甲醇溶液。