两面针-氯化两面针-含量测定方法-HPLC-UV

仪器   日本岛津LC-10AT VP高效液相色谱仪、SPD-10AVP紫外检测器；威玛龙色谱数据处理工作站

色谱条件    色谱柱：Reliasil C18 （4.6 mm ×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水-三乙胺-磷酸（25∶75∶1∶1)；检测波长：271 nm；柱温：室温

对照品溶液制备    精密称取氯化两面针碱对照品24 mg，用少量甲醇溶解并转移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度处，摇匀，制得浓度为2.4 mg/mL的氯化两面针碱对照品储液Ⅰ；再精密吸取0.5 mL对照品储液Ⅰ至25 mL容量瓶中，加入甲醇至刻度处，摇匀，制得浓度为48 μg/mL的氯化两面针碱对照品储液Ⅱ；再精密吸取1 mL对照品储液Ⅱ至5 mL容量瓶中，加流动相至刻度处，摇匀，配成每1 mL含9.6 μg氯化两面针碱的对照品溶液。

供试品溶液制备    精密称取样品粗粉约1 g，置于索氏提取器中，用5 mL盐酸（5→100)浸润30 min 后，加入100 mL甲醇，加热回流6 h，回收甲醇，蒸干，用甲醇溶解定容至25mL，摇匀，过滤，取续滤液1 mL置于25 mL容量瓶中，用流动相定容，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。