方法名称： |
连翘-连翘甙含量测定-HPLC-UV |
应用范围： |
用于连翘中连翘甙的含量测定 |
方法原理： |
本品粉末加甲醇进行超声提取，经液相色谱分离，测定峰面积，用外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪带二极管阵列检测器 色谱条件 色谱柱：ZORBA Eclipse DBC18（250 mm ×4. 6 mm，5 ；流动相：乙腈-水，梯度洗脱；柱温：25 ℃；流速：0. 8 mL/ min；梯度洗脱条件：φ（乙腈)为10 %→15 %→25 %→40 %→10 %，时间分别10，20，35，50，60 min |
试样制备： |
对照品溶液的制备 称取连翘甙标准品1.5 mg，加入甲醇溶解，用一次性有机相过滤球（0. 45 μm)滤过，制成0.3 mg/mL溶液。 供试品溶液的制备 取不同产地连翘果实干燥（40 ℃)粉碎过120目筛，称取1.0 g，置于50 mL具塞锥形瓶中，加入甲醇15 mL，称重后密塞浸渍过夜，超声处理25 min后称重，用甲醇补重，摇匀滤过，蒸至近干，加中性氧化铝0.5 g拌匀，加于中性氧化铝柱（0. 15～0. 18 mm，1 g，内径为1. 5 cm)，用φ（乙醇)=70 % 80 mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用甲醇溶解后转移至5 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，用一次性有机相过滤球（0.45 μm)滤过，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取连翘甙对照液以及连翘供试品溶液各60 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算连翘甙含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
顾华，盖玲，周铜水等. 中药材连翘道地性的分子生物学探讨. 复旦学报（自然科学版).2002，41（6)：664~668 |
