方法名称: |
银翘解毒汤-连翘苷含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于银翘解毒汤中连翘苷的含量测定 |
方法原理: |
本品加开水(95 ℃)浸泡提取,经液相色谱分离,在277 nm处测定峰面积,用外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国惠普公司);UV 检测器 色谱条件 色谱柱:C18柱(4.6×200 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(25∶75);流速:1 mL/min;柱温:室温;检测波长:277 nm |
试样制备: |
对照品溶液的制备 取连翘苷对照品,加甲醇制成每1 mL含75.0 μg的溶液,即得。 供试品溶液的制备 称取银翘解毒汤超微饮片与其传统饮片各50 g,超微饮片置夹层保温杯中用开水(95 ℃)浸泡二次,第一次用8倍开水浸泡20 min,第二次用6倍开水浸泡15 min;传统饮片按汤剂制备方法煎煮二次(加水量与煮沸时间同超微饮片),分别过滤,滤液合并,离心(1000 r/min,3 min),得样品K与Y。将样品K、Y分别定容至500 mL备用。分别吸取样品液K、Y各35 mL,浓缩至10 mL,加甲醇90 mL超声15 min,过滤,滤液以甲醇定容至100 mL,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取连翘苷对照液以及银翘解毒汤超微饮片与传统饮片供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算连翘苷含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
蔡光先,杨永华,陈燕军等. 银翘解毒汤超微饮片与传统饮片的化学对比研究. 中国实验方剂学杂志.2002,8(6):5~6 |