银翘解毒合剂-连翘苷、牛蒡苷含量测定方法-HPLC-UV

 仪器    岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪（日本岛津制作所)

 色谱条件   色谱柱：用十八烷基键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水（25：75)；检测波长：连翘苷277 nm，牛蒡苷280 nm      

 对照品溶液的制备　  精密称取连翘苷对照品1.07 mg，加乙醇定容至5 mL，即得（0.214 mg/mL)。精密称取牛蒡苷对照品2.675 mg，加甲醇定容至5 mL，即得（0.535 mg/mL)。

 供试品溶液的制备    1)取连翘药材粉末（过三号筛)约1 g，精密称定，置带塞锥形瓶中，精密加乙醇15 mL，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理25 min，静置冷却，密塞，称定重量用甲醇补足减失的重量摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL置蒸发皿中蒸至近干，加入0.5 g中性氧化铝，拌匀，再加入中性氧化铝柱（100~200目，1 g，内径1~1.5 cm)上，用70 %乙醇80 mL洗脱收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50 %的甲醇溶解后转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过（0.45 μm)即得。2)取牛蒡子药材粉末（过三号筛)约0.5 g，精密称定，置50 mL量瓶中，用移液管精密量取甲醇约45 mL再进行超声处理20 min，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过（0.45 μm)，即得。3)水提样品溶液的制备：精密量取水提液23.33 mL（相当于连翘1.2 g)，水浴蒸至稠膏状，加入1 g硅藻土，定量，拌匀，继续蒸干，研细，加入带塞锥形瓶中，加入甲醇15 mL，密塞称重，超声处理25 min，以下同连翘药材溶液供试品制备方法的操作，即得。4)醇提样品溶液的制备：精密量取乙醇提取液20.16 mL（相当于连翘1.2 g)，以下操作方法同水提样品溶液的制备。