方法名称: |
连翘提取物-金丝桃素含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于连翘提取物中金丝桃素的含量测定 |
方法原理: |
本品细粉加1 %NaOH溶液索氏提取,经液相色谱分离,在590 nm处测定峰面积,用外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters 高效液相色谱仪,配有510泵,490 多功能紫外检测器,PCM 柱温控制Ⅰ型六通进样阀;HS色谱工作站(杭州英谱科技开发有限公司) 色谱条件 色谱柱:Spherisorb C18(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙酸乙酯- 0.1 mol/L磷酸二氢钠,其体积比为265:210:530;流速:1.0 mL/min;检测波长:590 nm;柱温:40 ℃;进样量:10 μL |
试样制备: |
对照品溶液的制备 取对照品1.0 mg,用甲醇少量超声波溶解,冷却后定容至5 mL,配成金丝桃素质量浓度为0.02 mg/mL的甲醇溶液。 供试品溶液的制备 取植物样品于60 ℃左右烘干,弃去茎杆,研碎,过40目筛,精密称取样品1.0000 g于小滤纸筒内,于索氏提取器中先用乙醚脱脂,至乙醚层基本无色为止。用30倍原料质量的1 %NaOH溶液在95~100 ℃沸腾状态下浸提2 h,提取3次,合并滤液,用0.1 mol/ L HCL溶液中和滤液至pH值3为止,真空浓缩干燥即得提取物。用甲醇溶解提取物,于10 mL容量瓶中定容,过滤,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取金丝桃素对照液以及贯叶连翘供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算金丝桃素含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
程存归,孙翠荣. 野生及栽培贯叶连翘提取物中金丝桃素含量比较研究. 林产化学与工业.2004,24(4):99~102 |