方法名称： |
注射用双黄连-连翘苷含量测定-HPLC-UV1 |
应用范围： |
用于注射用双黄连中连翘苷的含量测定 |
方法原理： |
本品加50 %甲醇稀释，经液相色谱分离，在280 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Agilent 1100 全自动液相色谱仪系统（美国安捷伦公司) 色谱条件 色谱柱：Zorbax SB-C18柱（4. 6 mm ×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈（A)-1 %醋酸水溶液（B)（A + B =100 %)作梯度洗脱，t= 0～15 min，A-B（20∶80)，t= 15～30 min，A - B（30∶70)，t= 30～50 min，A-B（40∶60)；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：280 nm |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取60 ℃减压干燥至恒重的绿原酸对照品16.2 mg、105 ℃干燥至恒重的14.2 mg黄芩苷和五氧化二磷减压干燥至恒重的连翘苷8.6 mg分别置于3个100 mL量瓶中，各加50 %甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得3种对照品储备溶液。分别精密量取上述3种对照品储备液各5，10，15，20，25 mL至50 mL量瓶中，加50 %甲醇稀释至刻度，即得混合对照品溶液。 供试品溶液的制备 精密量取本品1 mL置50 mL量瓶中，加50 %甲醇稀释至刻度，混匀，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取绿原酸、黄芩苷和连翘苷对照液以及注射用双黄连供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
李湘平，尹桃. 高效液相色谱法同时测定注射用双黄连3组分含量. 中国医院药学杂志.2007，27（3)：411~412 |
