方法名称： |
贯叶连翘-金丝桃素的含量测定-HPLC |
应用范围： |
用于贯叶连翘中金丝桃素的含量测定 |
方法原理： |
本品粉末加甲醇回流提取，经液相色谱分离，利用荧光检测器测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 日本岛津的LC - 6A 泵，RF - 535 高效液相荧光检测器，CR - 3A 数据处理机，CTO - 6A 柱恒温箱 色谱条件 色谱柱：大连依利特公司C18 柱（5 μm，4.6 mm ×200 mm)；流动相：甲醇- pH6.5的磷酸盐缓冲液（0.006 mol/L至6.5)（55∶45)；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；荧光检测波长：λEX = 580 nm，λEM = 600 nm |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取金丝桃素对照品1.02 mg，置10 mL容量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.102 mg/ mL的对照品溶液。 供试品溶液的制备 精密称取贯叶连翘不同部位的均匀粉末各200 mg，分别置50 mL圆底烧瓶中，加入甲醇30 mL，60 ℃回流提取2 h，滤过，以甲醇洗涤残渣，合并洗涤液与滤液，转移至50 mL量瓶中，定容，摇匀。取少量该溶液以0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取金丝桃素对照液以及贯叶连翘供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算金丝桃素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
李俊，钱之玉，林芳. 高效液相色谱-荧光检测法测定贯叶连翘中金丝桃素的含量. 药物分析杂志. 2001，21（2)：114～116 |
