方法名称: |
不同生长期的连翘- 连翘酯苷及芦丁的含量测-HPLC-UV |
应用范围: |
用于不同生长期的连翘的连翘酯苷及芦丁的含量测定 |
方法原理: |
本品粉碎加75 %乙醇超声提取,经液相色谱分离,分别在328 nm(连翘酯苷)、254 nm(芦丁)处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 高效液相色谱仪,包括Waters515 HPLC Pump,Water s2996 检测器,Millennium32login 色谱管理者软件(美国Waters公司) 色谱条件 色谱柱:Dikma C18 柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相:乙腈- 0. 2 %醋酸水溶液(20∶80);流速:1.0 mL/min;检测波长:328 nm(连翘酯苷),254 nm(芦丁);柱温:室温 |
试样制备: |
对照品溶液的制备 1)连翘酯苷对照品溶液的制备:精密称取连翘酯苷对照品5. 5 mg,置于10 mL容量瓶中,加75 %乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得到0. 55 mg/mL的标准品储备液。精密移取标准品储备液1.00 mL,置于5 mL容量瓶中,加入75 %乙醇至刻度,摇匀,得到0.11 mg/ mL连翘酯苷对照品溶液。2)芦丁对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品5.0 mg,置于10 mL容量瓶中,加75 %乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得到0.150 mg/mL的标准品储备液。精密移取标准品储备液1.00 mL,置于5 mL容量瓶中,加入75 %乙醇至刻度,摇匀,得到0.10 mg/mL芦丁对照品溶液。 供试品溶液的制备 将采集来的连翘药材阴干,粉碎,研细。精密称取0.1 g,置10 mL容量瓶中,加75 %乙醇溶解并稀释至刻度,加盖超声40 min,用0. 45 μm针头式微孔过滤器滤过,弃去初滤液,取续滤液备用。 |
操作步骤: |
分别精密吸取连翘酯苷及芦丁对照液以及连翘供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算连翘酯苷及芦丁含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
庞维荣,赵平,刘养清等. 不同生长期的连翘中连翘酯苷及芦丁含量动态研究. 世界中西医结合杂志.2007,2(5):277~279 |