贯叶连翘及提取物-金丝桃苷的含量测定方法-HPLC-UV

仪器    美国Agilent 1100 型高效液相色谱仪（含四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、ChemStation色谱工作站)

色谱条件    色谱柱：依利特Kromasil C18（ 4. 6 mm×200 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0. 5%磷酸（ 45：55，v/v，用三乙胺调pH至3. 0)；流速：1. 0 mL/min；检测波长：360 nm；柱温：35 ℃

对照品溶液的制备  　精密称取金丝桃苷对照品4. 93 mg，置5 mL棕色量瓶中，加甲醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀制得0. 986 mg/mL对照品贮备液。从中精密量取200 μL加甲醇稀释至1 mL棕色量瓶，制成0. 1972 mg/mL对照品溶液。

供试品溶液的制备  　1)原药材供试品溶液的制备：取贯叶连翘药材粉碎，过80目筛，混匀，称取28 mg，精密称定，置5 mL量瓶中，加适量甲醇，超声处理30 min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以5000 r/min离心5 min，取上清液经0. 20 μm PTFE滤膜过滤，取续滤液，即得。2)提取物供试品溶液的制备：称取贯叶连翘提取物15 mg，精密称定，置10 mL棕色量瓶中，加适量甲醇，超声处理30 min溶解，加甲醇稀释至刻度，经0. 20 μm PTFE 滤膜过滤，取续滤液，即得提取物供试品溶液。