方法名称： |
辣椒制品—苏丹色素—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于辣椒制品中苏丹色素含量的测定 |
方法原理： |
本品加乙腈超声提取，经液相色谱分离，在478 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Agilent100 型液相色谱仪，配自动进样器和二级管阵列检测器 色谱条件 色谱柱：LiChorCART250-4HPLC-Cartridge Superspher 100RP-18（250 mm×4.6 mm，5.0 μm)；流动相：体积分数为16. 5 %的冰醋酸水溶液( %)-乙腈0→10min：（30：70)→（5：95)；10→20 min：（5：95)→（0：100)；20→30min：（0：100)；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：478 nm；进样量：20 μL
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试样制备： |
对照品溶液制备 500 mg/L标准贮备溶液：分别称量50 mg（精确到0.1 mg)按纯度折算为100 %含量的苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ4种色素的标准品，苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ用乙腈溶解并定容于100 mL容量瓶中，苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ用三氯甲烷溶解，用乙腈定容于100 mL容量瓶中。各种苏丹色素的质量浓度分别于500 mg/L。 供试品溶液制备 称取粉碎均匀的辣椒制品（辣椒粉、辣椒酱、辣椒油等)10 g于50 mL的离心管中，加20 mL乙腈，充分振荡，超声提取20 min，离心后取上清液，再重复提取1次，合并上清液，定容至50 mL，混合均匀后取5 mL上清液吹氮浓缩至1 mL，过0.45 μm的滤膜，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取苏丹色素对照液以及辣椒制品供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苏丹色素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
刘昱，岳振峰，彭艳等.高效液相色谱法快速测定辣椒制品中苏丹色素含量.中国国境卫生检疫杂志. 2005.28（2)： 110～112 |
