方法名称: |
辣椒制品—辣椒素—HPLC-UV |
应用范围: |
本方法适用于辣椒制品中辣椒素含量的测定 |
方法原理: |
本品加入甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液超声提取,经液相色谱分离,在280 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 高效液相色谱仪(Agilent 1100),美国安捷伦公司 色谱条件 色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(5 μm,250×4.6 mm);流动相:V(甲醇):V(水)=80:20;流速:0.8 mL/min;柱温30.0℃;检测波长:280 nm;进样量:10 μL |
试样制备: |
对照品溶液制备 精确称取25 mg辣椒素和25 mg二氢辣椒素放入经甲醇洗涤过的烧杯中,加入少量甲醇溶解,然后溶液转入25 mL容量瓶中,用甲醇定容,作为标准贮备液。分别精密量取辣椒素、二氢辣椒素标准贮备液各1 mL置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为标准溶液。 供试品溶液制备 将辣椒制品捣碎、均质,准确称取2.5g样品于100 mL烧杯中,加入甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液25 mL,用塑料薄膜封口,然后使用超声波清洗器提取30 min。用滤纸过滤,收集滤液,然后将滤渣连同滤纸重新用甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液25 mL,使用超声波清洗器提取10 min,重复两次。将三次过滤收集的滤液合并并浓缩,然后用甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液定容至50 mL,经0.45 μm滤膜过滤,取续滤液,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取辣椒素对照液以及辣椒制品供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算辣椒素含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
王燕,夏延斌,熊科等.高效液相色谱法-紫外检测器测定辣椒制品中辣椒素的含量.食品科学. 2006.27(9): 193~196 |