方法名称: |
辣椒风湿软膏—总辣椒碱—RP-HPLC |
应用范围: |
本方法适用于辣椒风湿软膏中宗辣椒碱含量的测定 |
方法原理: |
本品加人甲醇提取,经液相色谱分离,在280 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Agilent1100型自动进样液相色谱仪,在线脱气机,四元泵试剂 色谱条件 色谱柱:ZorbaxC18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-2.5 %乙酸溶液(60∶40);流速:2.0 mL/min;柱温:30 ℃;检验波长:280 nm;进样量:20 μL |
试样制备: |
对照品溶液制备 取辣椒碱对照品约10 mg,精密称定,置25 mL量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取10 mL,置100 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀即得。 供试品溶液制备 取辣椒风湿软青供试品约4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加人30 mL甲醇,在50一60℃水浴中温热使溶解,转入50 mL量瓶中,用甲醇少量分次洗涤锥形瓶,将洗液并人量瓶中,冷至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,于60 ℃水浴中保温30 min,再于冰浴中冷却,放置至室温,滤过,取续滤液即得辣椒风湿软膏供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取辣椒碱对照液以及辣椒风湿软膏供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算总辣椒碱含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
毛庆,张小松,何华.反向高效液相色谱法测定辣椒风湿软膏中总辣椒碱含量.药物鉴定. 2007.16(8): 36 |