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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:辣椒制品—苏丹红Ⅰ~Ⅳ号—HPLC-UV中药质量控制方法/操作步骤
    

辣椒制品—苏丹红Ⅰ~Ⅳ号—HPLC-UV

  
方法名称:
  辣椒制品—苏丹红Ⅰ~Ⅳ号—HPLC-UV
应用范围:
  本方法适用于辣椒制品中苏丹红Ⅰ~Ⅳ号含量的测定
方法原理:
 本品加入正己烷振摇提取,经液相色谱分离,在229 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器   LC-10A型高效液相色谱仪(配有SPD-M10A二极管阵列检测器,自动进样器,岛津公司)

色谱条件    色谱柱:DIKMA公司C18(150×4.6 mm,5 μm)钻石柱;流动相:含5 %水的乙腈溶液;流速:1 mL/min;检测波长:229 nm;柱温:25℃;进样量:10 μL

试样制备:
 

对照品溶液制备    分别配制1 mg/mL的苏丹红I~IV号标准储备液和0.4 mg/mL的I~IV号混合标准储备液,置于冰箱中保存。

供试品溶液制备    1)辣椒粉样品:取10 g均质后的辣椒粉样品,于100 mL的烧瓶中,加入30 mL正己烷振摇20 min,3000 r/min离心5 min,取上清液;将残渣用正己烷重新处理3~5次,使最后处理的上清液近无色,合并上清液,用真空旋转蒸发器蒸干,残渣用正己烷溶解并定容到2 mL,将此溶液保存以备纯化。取FLORISIL的SPE小柱,用3 mL正己烷淋洗并抽干。然后取样品液1 mL,再用4 mL氯仿进行冲洗,收集洗脱液,洗脱液用氮气吹干,再用1 mL氯仿溶解后经0.45 μm滤膜过滤,即得。2)辣椒油样品:取10 g辣椒油样品,用正己烷溶解后,如样品苏丹红浓度较高可直接按上法对样品进行纯化;如果浓度太低则需用化铝层析的国标法进行纯化,收集洗脱液,用真空旋转蒸发器蒸干,残渣用正己烷溶解并定容到2 mL,经0.45 μm滤膜过滤,即得。

操作步骤:
  分别精密吸取苏丹红Ⅰ~Ⅳ号对照液以及辣椒制品供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苏丹红Ⅰ~Ⅳ号含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  李吉平,刘文森,高宏伟等.HPLC紫外检测法测定辣椒制品中苏丹红Ⅰ~Ⅳ号含量的研究.食品科学. 2007.28(8): 332~336
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