辣椒制品—苏丹红Ⅰ～Ⅳ号—HPLC-UV

仪器   LC-10A型高效液相色谱仪（配有SPD-M10A二极管阵列检测器，自动进样器，岛津公司)

色谱条件    色谱柱：DIKMA公司C18（150×4.6 mm，5 μm)钻石柱；流动相：含5 %水的乙腈溶液；流速：1 mL/min；检测波长：229 nm；柱温：25℃；进样量：10 μL

对照品溶液制备    分别配制1 mg/mL的苏丹红I～IV号标准储备液和0.4 mg/mL的I～IV号混合标准储备液，置于冰箱中保存。

供试品溶液制备    1)辣椒粉样品：取10 g均质后的辣椒粉样品，于100 mL的烧瓶中，加入30 mL正己烷振摇20 min，3000 r/min离心5 min，取上清液；将残渣用正己烷重新处理3～5次，使最后处理的上清液近无色，合并上清液，用真空旋转蒸发器蒸干，残渣用正己烷溶解并定容到2 mL，将此溶液保存以备纯化。取FLORISIL的SPE小柱，用3 mL正己烷淋洗并抽干。然后取样品液1 mL，再用4 mL氯仿进行冲洗，收集洗脱液，洗脱液用氮气吹干，再用1 mL氯仿溶解后经0.45 μm滤膜过滤，即得。2)辣椒油样品：取10 g辣椒油样品，用正己烷溶解后，如样品苏丹红浓度较高可直接按上法对样品进行纯化；如果浓度太低则需用氧化铝层析的国标法进行纯化，收集洗脱液，用真空旋转蒸发器蒸干，残渣用正己烷溶解并定容到2 mL，经0.45 μm滤膜过滤，即得。