方法名称: |
不同品种辣椒药材—辣椒碱—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于不同品种辣椒风湿贴中辣椒碱含量的测定 |
方法原理: |
本品粗粉加95 %乙醇置恒温水浴锅中60 ℃减压回流提取,经液相色谱分离,在281 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 日本岛津高效液相色谱仪(LC-10ATVP溶剂输入泵,SPD-10AVP 紫外检测器),HW-2000色谱工作站(南京千谱软件有限公司 色谱条件 色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm,迪马公司);流动相:甲醇-水-磷酸(70︰30︰0.1);流速:1.0 mL/min;检测波长:281 nm;柱温:30 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取辣椒碱对照品25.15 mg,置于50 mL容量瓶中,加95 %乙醇溶解并稀释至刻度,得辣椒碱浓度为503 μg/mL的对照品贮备液,用时适当稀释。 供试品溶液制备 取本品粗粉约6.0 g,精密称定,置于250 mL圆底烧瓶中,加入9倍量(V/W)95 %乙醇,置于恒温水浴锅中60 ℃减压回流提取2.0 h,残渣加等量95 %乙醇再提取1次,合并2次提取液,并用95 %乙醇定容至108 mL,0.45 μm微孔滤膜过滤,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取辣椒碱对照液以及辣椒供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算辣椒碱含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
李坚,龙晓英,孙娟等.HPLC法测定不同品种辣椒药材中辣椒碱的含量.中药新药与临床病理. 2006. 17(3): 202~205 |