方法名称: |
芦荟—β-胡萝卜素—RP-HPLC |
应用范围: |
本方法适用于芦荟中β-胡萝卜素含量的测定 |
方法原理: |
本品匀浆加入丙、石油醚提取,经液相色谱分离,在450 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters515液相色谱仪(美国Waters公司),配用2487 紫外检测器,Millenium32色谱工作站 色谱条件 色谱柱:Supelco(2.5 mm×250 mm,4 μm);流动相:甲醇∶氯仿=85∶15(v/v);流速:0.5 mL/min;检测波长:450 nm |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取β-胡萝卜素标准品置于容量瓶中,以三氯甲烷溶解并稀释至刻度,配制适宜浓度标准溶液。 供试品溶液制备 取匀浆样品1~5 g置于100 mL具塞锥形瓶中,加入丙酮20 mL,石油醚5 mL,振摇10 min,静置5 min,将提取液转入盛有100 mL 5 %硫酸钠液的分液漏斗中,于锥形瓶中加入10 mL丙酮- 石油醚混合液(3∶7 v/v)提取,将提取液并入分液漏斗中。如此提取2~3次,直至提取液使无色为止。将上述提取液经5 %硫酸钠溶液洗涤后,进行浓缩,并用氮气吹干,加入2 mL甲醇溶解、过滤,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取β-胡萝卜素对照液以及芦荟供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算β-胡萝卜素含量。 |
附件: |
点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com) |
备注: |
|
参考文献: |
雷绍荣,欧阳华学.反相高效液相色谱法测定芦荟中β-胡萝卜素含量.西南农业学报. 2005. 18(6): 874~875 |