方法名称： |
卷柏类药材—双黄酮—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于卷柏类药材中双黄酮含量的测定 |
方法原理： |
本品加氯仿索氏提取，再加甲醇加热回流提取，经液相色谱分离，在330 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Agilent1100液相色谱仪，1100泵，1100紫外可见光检测器，1100色谱工作站 色谱条件 色谱柱：Elite-ODS（5 μm，150 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇-0.050 mol/L磷酸二氢钠溶液系统，梯度洗脱，0→6min，甲醇57.5 % →70.0 %；流速：1.5 mL/min；柱温：40 ℃；检测波长：330 nm |
试样制备： |
对照品溶液制备 分别精密称取对照品穗花杉双黄酮5 mg、扁柏双黄酮2 mg、银杏双黄酮5 mg，各置于50 mL量瓶中，加入甲醇20 mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，溶液浓度分别为穗花杉双黄酮96.4 μg/mL、卷柏双黄酮43.8 μg/mL、银杏双黄酮100.8 μg/mL，作为对照品。 供试品溶液制备 样品粉碎，过40目筛，精密称取0.5 g，置索氏提取器中，加氯仿50 mL回流脱脂3 h，过滤，残渣挥净氯仿后加入甲醇50 mL，加热回流提取10 h，过滤，提取液浓缩，于25 mL容量瓶中甲醇定容，摇匀，即得 |
操作步骤： |
分别精密吸取穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、银杏双黄酮对照液以及卷柏类药材供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、银杏双黄酮含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
刘海青，林瑞超，冯芳等.HPLC法测定卷柏类药材中双黄酮成分的含量.药物分析杂志. 2002. 22（5)： 392～395 |
