方法名称: |
不同产地牛膝—蜕皮甾酮的含量测定—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于不同产地牛膝中蜕皮甾酮含量的测定 |
方法原理: |
本品粉末加乙醇回流提取,经液相色谱分离,在243 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Shimadzu高效液相色谱仪(日本岛津公司),检测器SPD-10A,柱温箱CTO-10A 色谱条件 色谱柱:ODS柱(150 mm×6 mm,5 μm,日本岛津公司);流动相:甲醇—水(45∶35);检测波长:243 nm ;柱温:40℃;流速:0.7 mL/min |
试样制备: |
对照品溶液制备 取蜕皮甾酮约1 mg,精密称定,置50 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1 mL含蜕皮甾酮20 μg)。 供试品溶液制备 取牛膝粉末(过40目筛)各约5 g,精密称定,置索式提取器中,加乙醇100 mL,回流6 h,提取液回收乙醇并浓缩至近干,残渣加水10 mL微温溶解,滤入分液漏斗中,并以水10 mL分次洗涤仪器和残渣,用水饱和的正丁醇提取5次(20,20,15,15,10 mL),合并正丁醇液,水浴蒸干,用甲醇溶解并转移至10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀;精密吸取1 mL,置50 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取蜕皮甾酮对照液以及牛膝供试品溶液各5 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算蜕皮甾酮含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
张翠英,梁生旺,张广强. 不同产地牛膝中蜕皮甾酮的含量测定. 中国药学杂志 .2001,36(10):699~700 |