方法名称: |
苦丁茶—熊果酸的含量测定—RP-HPLC |
应用范围: |
本方法适用于苦丁茶中的熊果酸含量的测定 |
方法原理: |
本品粗粉加95 %乙醇回流提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 BT8100 高效液相色谱仪(美国Bi0tr0nic公司),BT8200 紫外可见检测仪(美国Bi0tr0nic公司),C2R6A chr0mat0pac 自动积分仪(美国Bi0tr0nic公司) 色谱条件 色谱柱:Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,10 μm) ;动相:甲醇-水-磷酸二氢钠-乙二胺(90∶10∶0.20∶0.02) ;检测波长:220 nm;流速:0.6 mL/min;柱温:25 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 取熊果酸标准品配制成浓度为0.2680 mg/mL熊果酸对照品溶液。 供试品溶液制备 称取1.000 g苦丁茶粗粉,加入14 mL体积分数为90 %乙醇-水溶液,在85 ℃水浴上回流提取2次,每次2 h,过滤除去滤渣,合并2次提取液。用20 %Na0H调节提取液的pH=9~11,除去大分子杂质,所得滤液用10 % H2S04酸化至pH=1~2,过滤所得沉淀,水洗至中性,干燥,得到熊果酸富集物。用甲醇溶解并定容至10 mL,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取熊果酸对照液以及苦丁茶供试品溶液各6 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算熊果酸含量。 |
附件: |
点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com) |
备注: |
|
参考文献: |
任秀莲,周春山,魏琦峰等. 反相高效液相色谱法测定苦丁茶中的熊果酸. 光谱实验室. 2004,21(4):693~697 |