方法名称： |
荆芥穗有效部位—木犀草素和橙皮苷的含量测定—RP—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于荆芥穗有效部位中木犀草素和橙皮苷含量的测定 |
方法原理： |
荆芥穗有效部位干膏加50 %乙醇超声溶解，经液相色谱分离，在283 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 Waters 600高效液相色谱泵，Waters 2487 DualλAbsorbance检测器，Millennium32 Chromatography Manager 化学工作站 色谱条件 色谱柱：TECHSPHERE ODS 色谱柱（250 mm× 416 mm，5 μm)；流动相：A（乙腈)，B（0.2 %磷酸溶液)，二元梯度洗脱，梯度洗脱条件为：0～20 min VA∶VB = 20∶80；20～30 min VA∶VB = 25∶75 ；30～50 minVA∶VB = 30∶70；洗脱流速：1.0 mL/ min；检测波长：283 nm |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取木犀草素对照品6 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇超声溶解，定容至刻度，摇匀，即得浓度为0.06 g/L的木犀草素对照品储备液。再精密称取橙皮苷对照品11.25 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇超声溶解，定容至刻度，摇匀，即得浓度为0.45 g/L的橙皮苷对照品储备液。分别精密吸取木犀草素对照品储备液和橙皮苷对照品储备液各1 mL，置同一10 mL容量瓶中，加甲醇稀释，定容至刻度，摇匀，即得含木犀草素0.006 g/L和橙皮苷0.045 g/L的对照品溶液。 供试品溶液制备 精密称取荆芥穗有效部位干膏约100 mg，置25mL容量瓶中，加50 %乙醇超声使溶解，定容至刻度，摇匀。经0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取木犀草素和橙皮苷对照液以及荆芥穗有效部位供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以外标法计算木犀草素和橙皮苷含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
胡峻，石任兵，张援虎. 高效液相色谱法测定荆芥穗有效部位中木犀草素和橙皮苷的含量. 北京中医药大学学报. 2005，28（4)：52～54 |
