方法名称： |
白芍提取物--总苷含量测定--HPLC法 |
应用范围： |
白芍提取物中总苷含量测定 |
方法原理： |
白芍经水煎煮，过大孔吸附树脂柱净化，得白芍总苷样品，总苷样品经5%经氧化钠超声处理，沸水浴水解，经高效液相色谱仪分离，在230nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 高效液相色谱仪，包括Waters1525泵，2487双通道紫外检测器，Waters柱温箱，Breeze液相工作站； 色谱条件 Phenomenex Luna C18(2)色谱柱（4.6×150mm，5μm)；柱温：35℃；流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾-异丙醇-醋酸（67：173：4：4)；检测波长：230nm；流速：1.0mL/min。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取8.8mg芍药苷对照品，置10mL量瓶中，加5%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀。精密吸取该溶液1mL，置5mL具塞试管中，沸水浴水解2h，冷却，转移至20mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 称取市售白芍饮片1.0kg，第一次加水10倍，煎煮2.0h，第二次加水8倍，煎煮1.5h，合并煎液，滤过，滤液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用水洗涤，再用70%乙醇洗脱，回收乙醇，干燥，得棕紫色粉末，即为白芍总苷。精密称定白芍总苷样品约30mg置25mL量瓶中，加5%氢氧化钠溶液至刻度，超声，溶解，摇匀。精密吸取该溶液0.5mL，置5mL具塞试管中，沸水浴水解2h后，放冷至室温，转移至10mL量瓶中，用流动相定容置刻度，摇匀，即得。 |
操作步骤： |
精密吸取该溶液5μL，注入色谱仪，由峰面积计算出白芍总苷的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
刘玉红,陈燕,黄志芳等.RP-HPLC测定白芍提取物的总苷含量.中国中药杂志.2007,32(11):1114-1115 |
