方法名称： |
白芍提取物--白芍总苷含量测定--HPLC法 |
应用范围： |
测定白芍提取物中白芍总苷的含量 |
方法原理： |
白芍药材水提取得白芍总苷，白芍总苷经5%NaOH经超声处理，沸水浴水解，经液相色谱仪分离，在230nm处测定峰面积，以苯甲酸为对照品，计算其中白芍总苷的含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Waters 1525泵，2487双通道紫外检测器，Waters柱温箱，Breeze 液相色谱工作站(美国Water 公司)； 色谱条件 Supelco Discovery C18色谱柱(4.mm×150.mm,5μm)；流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾-异丙醇-冰醋酸(67∶173∶4∶4)；检测波长：230nm；流速：1mL/min；柱温：35℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精称5.2mg苯甲酸对照品，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密吸取该溶液1mL，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制得浓度为8.32μg·mL- 1的苯甲酸对照品溶液。 供试品溶液的制备 称取市售白芍饮片1.0kg，加水10倍，煎煮2.0h，第2次加水8倍，煎煮1.5h，合并煎液，滤过，滤液过已处理好的大孔吸附树脂，先用水洗涤，再用70%乙醇洗脱，回收乙醇，干燥，得紫棕色粉末，即为白芍总苷。精密称取白芍总苷粗品约30mg至25mL量瓶，加5%NaOH溶液至刻度，超声，溶解，摇匀。精密吸取该溶液0.5mL，置5mL具塞试管中，沸水浴水解2h后，冷却至室温，转移至10mL量瓶，用流动相与甲醇反复荡洗试管壁，定容至刻度，摇匀，即得。 |
操作步骤： |
精密吸取该溶液5μL，注入色谱仪，由峰面积计算出苯甲酸的含量，再由公式：白芍总苷含量% = 苯甲酸含量%×480.27 122.12，计算白芍总苷的含量。 |
附件： |
点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com) |
备注： |
|
参考文献： |
刘玉红,陈燕,易进海.HPLC测定白芍总苷的含量.华西药学杂志.2002,17(4):295～296 |
