方法名称： |
黄柏-小檗碱与黄柏碱的含量测定-HPLC-UV |
应用范围： |
用于黄柏中小檗碱与黄柏碱的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加1%醋酸-甲醇溶液水浴回流提取，经液相色谱分离，分别在284nm和345nm处测定峰面积，按外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 HP1100 Series 高效液相色谱仪；HP G1315A二极管阵列检测器；HP Chem Station 4.0 色谱工作站。 色谱条件 Merck-Lichrospher RP-C18色谱柱 (250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.3%磷酸二乙胺梯度洗脱{15/85（0～10min)；35/65（10～25min)}，检测波长：284nm（用于检测黄柏碱)；345 nm（用于检测小檗碱)；流速：0.8ml·min - 1；柱温：25℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取黄柏碱、小檗碱对照品适量，加甲醇溶解并定容，分别制成浓度为黄柏碱128μg·mL-1，小檗碱408μg·mL-1 的溶液，备用。精密吸取上述对照品溶液各1mL，置2mL 容量瓶中，充分混匀，制成对照品混和溶液，即得。 供试品溶液的制备 取黄柏药材粉末约0.5g，精密称定，加1%醋酸-甲醇溶液30ml，称重，水浴回流提取2次，每次1h，冷却后称重，加溶剂补足重量，过滤，合并滤液，水浴蒸干溶剂，残渣以甲醇溶解并定容至10ml，即得。 |
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各10μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
祝晨，林朝展，莫建霞.HPLC测定黄柏药材中小檗碱与黄柏碱的含量. 中药新药与临床药理. 2004，15(4)：262～264 |
