方法名称: |
黄柏-小檗碱和巴马汀的含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于黄柏中小檗碱和巴马汀的含量测定 |
方法原理: |
本品细粉加盐酸一甲醇(1:100)溶液超声提取,经液相色谱分离,在345nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 Agilent 1100高效液相色谱仪系统;杭州英谱色谱工作站 色谱条件 色谱柱DiamonsilTMC18(250mm ×4.6mm,5μm);流动相:水一乙腈一冰醋酸一三乙胺(67:33:0.3:0.8,v/v);检测波长:345nm;流速1.0 ml·min -1;柱温:20℃;进样量:20μl。 |
试样制备: |
对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱和盐酸巴马汀对照品各10.0mg置25ml量瓶中,分别加甲醇溶解定容至刻度,配置成40μg/ml储备液,分别精密吸取小檗碱和巴马汀储备液各0.5ml和0.25ml,加甲醉溶解并定容至10ml,制成1ml含小檗碱20μg和10μg巴马汀的对照品混合溶液 供试品溶液的制备 将黄柏药材粉碎,过20目筛,精密称取干燥的黄柏药材粉末0.25g于锥形瓶中,精密加入盐酸一甲醇(1:100)溶液50ml,称定重量,冷浸15min,超声提取20min,放冷,补足重量,摇匀,0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
在选定的色谱条件下,分别吸取对照品和供试品溶液各20μl进样,测定峰面积值,按外标法计算含量 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
马蓉蓉,唐意红,马春辉等. HPLC一UV法同时测定不同产地黄柏中小檗碱和巴马汀的含量. 黑龙江医药. 2007,20(6):560~562 |