方法名称： |
防风—升麻素苷、升麻素、5 - O - 甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷含量测定—HPLC-UV |
应用范围： |
可用于防风中升麻素苷、升麻素、5 - O - 甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷四种成分的含量测定 |
方法原理： |
本品经乙醇回流提取，过柱，经液相色谱分离，在254nm处测定峰面积，以外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Waters 515高效液相色谱仪；2487紫外检测器；Millennium32软件系统； 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax C18色谱柱( 416 mm ×150 mm， 5μm)；流动相:甲醇-水梯度洗脱；33%甲醇(0～10 min)；33% ～50%甲醇( 11～40 min)；流速：1.0 mL /min；检测波长: 254 nm；柱温：室温； |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取升麻素苷、升麻素、5 - O - 甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷对照品2.49、1.85、2.00、2.12mg,分别置25 mL量瓶中,加甲醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，备用。 供试品溶液的制备 取防风药材,适量稀乙醇回流提取，提取液回收溶剂,残留物加水分散，通过大孔吸附树脂柱，树脂柱水洗除杂后，用稀乙醇洗脱；乙醇洗脱液回收溶剂，残留物减压干燥，得防风色原酮部位；精密称取防风色原酮部位约10 mg，置5 mL量瓶中，加50%乙醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，备用。 |
操作步骤： |
精密吸取上述供试品溶液10μL，注入液相色谱仪，测定各色谱峰峰面积，外标一点法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
本方法可同时测定防风药材中升麻素苷、升麻素、5 - O - 甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷四种成分的含量 |
参考文献： |
姜艳艳，刘斌，石任兵等.高效液相色谱法测定防风色原酮部位中4种成分含量. 北京中医药大学学报.2006，29（2)：128～131 |
