方法名称： |
防风—防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅰ,防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷的含量测定-HPLC-DAD |
应用范围： |
可用于防风的防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷、防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷、防风色原酮Ⅰ、防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷4 个成分的含量测定, |
方法原理： |
本品加甲醇回流提取，经液相色谱分离，在254nm处测定峰面积，以外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Agilent 1100 泵高效液相色谱仪，光电二级管阵列检测器；自动进样器及软件。 色谱条件 Alltima C18色谱柱(416 mm ×150mm ,5μm) ，phenomenex 保护柱，甲醇-水梯度洗脱；检测波长254 nm，流速：110 mL·min - 1 ，柱温35℃。0→15min：水65%；15→25min：水65→45%；25→35 min：水45%；35→40 min：水0%。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取对照品防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷、防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷、防风色原酮Ⅰ、防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷各适量，加甲醇分别配成0.0388，0.0396，0.0292，0.0270 mg·mL - 1的对照品溶液. 供试品溶液 取防风药材、饮片各约015g，精密称定，精密加入甲醇25 mL，称定重量，回流提取2h，取出，放至室温，称重，以甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，过微孔滤膜，即得。 |
操作步骤： |
准确吸取对照品溶液5μL，供试品溶液10μL，注入液相色谱仪，按测定法进行测定。 |
附件： |
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备注： |
HPLC梯度洗脱法测定防风中4 种主要成分含量比原方法简便、易于操作。 |
参考文献： |
李丽，刘元艳，耿立冬等.HPLC梯度洗脱法测定防风中4 种主要成分含量.中国中药杂志.2006，31（3)：194～196 |
