方法名称： |
灯盏花素纳米脂质体--灯盏花素含量测定—HPLC法 |
应用范围： |
用于灯盏花素纳米脂质体药物灯盏花素的含量测定 |
方法原理： |
灯盏花素纳米脂质体经注射用水水合，10%Triton X-100破乳后以流动相（乙腈-水-冰醋酸-三乙胺，16：81：2：1)溶解，经液相色谱仪分离，在335nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Waters 高效液相色谱仪（510型泵，486型可变波长紫外检测器，2010色谱管理软件)；透析袋（瑞典Pharmacia公司进口分装，截留分子质量8000~10000，批号：20030124) 色谱条件 色谱柱：Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm，大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：乙腈-水-冰醋酸-三乙胺（16：81：2：1)；柱温：40℃；流速：1.2m/min；紫外检测波长：335nm。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 以甲醇准确配置浓度为0.1mg/ml的灯盏花乙素对照品储备液。精密量取该溶液适量，用流动相稀释成浓度为10.0μg/ml的溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密称取灯盏花素前体脂质体（相当于灯盏花乙素5.0mg)适量于25m量瓶中，用注射用水水合并定容至刻度，即得纳米脂质体溶液。精密称取该液0.5ml置10ml量瓶中。加入10%Triton X-100的乙醇溶液1ml破乳，以流动相定容，摇匀，即得。 |
操作步骤： |
分别精密对照品溶液与供试品溶液20μl，按上述色谱条件注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，外标法计算样品中灯盏乙素的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
熊非，朱家壁，田煦等.RP-HPLC法测定灯盏花素纳米脂质体药物含量及包封率.药物分析杂志,2004,24(4):364-366 |
