方法名称： |
灯盏细辛--野黄芩苷含量测定--HPLC法 |
应用范围： |
灯盏细辛药材中野黄芩苷的含量测定 |
方法原理： |
灯盏细辛经50%乙醇超声提取，提取液水溶解后以乙酸乙酯萃取，水层用流动相（乙腈-水-四氢呋喃-磷酸，15：85：1.5：0.1)溶解，经液相色谱仪分离，在335nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 LC-10AD高效液相色谱仪，SPD-10A紫外可见检测器，CLASS-LC10色谱工作站； 色谱条件 色谱柱：Hypersil-ODS 2(200mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-水-四氢呋喃-磷酸（15：85：1.5：0.1)；流速：0.8ml/min；检测波长：335nm；柱温：30℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称定野黄芩苷对照品适量置50ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，制成浓度为0.224mg/ml的溶液，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取干燥的药材粉末约0.5g，精密称定，置干燥锥形瓶中，用50%乙醇10ml超声提取3次，每次20min，滤过，合并滤液，减压挥干，用水30ml溶解并称量转移至125ml分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，弃去有机层，收集水层减压挥干，用流动相溶解并定量转移至50ml量瓶中，定容，摇匀，即得。 |
操作步骤： |
分别精密对照品溶液与供试品溶液20μl，按上述色谱条件注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，外标法计算样品中灯盏乙素的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
林燕芝,陈晓辉,唐星等.RP-HPLC测定灯盏细辛中野黄芩苷的含量.药物分析杂志.2005,25(5):594-596 |
